订购信息：

特性说明：

使用说明：

产品描述

伊文思蓝(Evans Blue, CAS NO: 314-13-6) ,也称作埃文斯蓝，是一种非膜渗透性的染料。当质膜受损，染料能进入细胞质和细胞核，从而将其染成蓝色，可用来检测细胞活力。伊文思蓝还能用来研究血脑屏障(BBB)渗透性，通过与白蛋白结合从而指示血脑屏障穿透蛋白能力。

推荐使用0.5%的伊文思蓝染色液，使用很方便，直接加入样本染色即可。

操作说明：

一.血脑屏障通透性

1.1 取处理后的动物(以小鼠为例) ,静脉注射伊文思蓝染色液(0.5%) ,使得小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5~ 1h后处死小鼠，取出目的脑组织。 [注意] :伊文思蓝染色液的注射用量需要根据动物类型以及体重来决定。

1.2 将脑组织置于1.5ml离心管中，加入1ml PBS， 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆，4°C离心。

1.3 取上清，加入等量三氯乙酸，4°C孵育。该步骤亦可采用如下操作:取上清，按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮，室温孵育24h。

1.4 4℃离心15min。

1.5 取上述溶液，用分光光度计测620 nm下的OD值。同时测定已知不同梯度的标准伊文思蓝的OD值，绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测样品的伊文思蓝含量.

二、细胞活力鉴定

2.1取100μl重县细胞到常规离心管内，加入100μl伊文思蓝染色液(0.5%) 轻轻混匀(染色时间可适当延长，但不宜超过10min)。

2.2吸取少量经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下:细胞存活率= (细胞总数-蓝色细胞数) /细胞总数x100%

注意事项：

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作

本产品仅供科研使用，不可用于临床诊断应用或其他用途。